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实验五 植物的组织培养(综合实验)
实验目标:理解植物细胞全能性概念和意义;学习各种培养基的制备和无菌操作的技术;学习获得无菌化的植物外植体的方法;体验植物组织培养过程并理解其成功的关键。
实验原理:植物细胞具有全能性。已经分化停止生长的细胞,在特殊的条件下,又能重新分裂,形成没有组织•结构的细胞团,即愈伤组织,这一过程称为“脱分化作用”。已经脱分化的愈伤组织,重新进行分化形成输导组织,以及根和芽等组织和器官,这一过程称为“再分化作用”。植物激素在此过程中起着重要作用。组织培养就是把植物的器官,组织以至单个细胞,应用无菌操作技术,使其在人工条件下,能够继续生长,甚至分化发育成一完整的植株的过程。
实验用具:无菌操作台,组织培养室,高压灭菌锅,水浴锅,电子天平,电炉,烧杯,接种工具,锥形瓶,烧杯,移液管,棉塞,棉线
NH4NO3, KNO3, CaCL2•2H2O, Ca(NO3)2•4H2O, MgSO4•7H20, KH2PO4, (NH4)2SO4, NaNO3, NaH2PO4•H2O, KCL ,各种激素
实验步骤:
1。基本培养基的配制
MS培养基的配制 (1)将所需每种大量元素按10倍份量称取出来,蒸馏水溶解,倒入烧杯中,最后定容。即为母液。
(2)将所需每种微量元素按100倍份量称取出来,蒸馏水溶解,倒入烧杯中,最后定容。即为母液。
(3)激素另配。
(4)按要求量取大量元素,微量元素,激素,加入糖,琼脂加热溶解,调节PH值,趁热倒入锥形瓶,每瓶20ml左右。
思考题:(1)进行植物组织培养时,实验的关键是什么?
(2)植物激素与器官分化有何关系?
(3)植物组织培养技术在生产上有何实践意义?
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