实验十一 植物多倍体诱发和鉴定

一、实验目的
1、了解人工诱导多倍体的原理
2、学习用秋水仙碱诱发多倍体植物的方法
3、学习识别多倍体植物的形态特征及其细胞学特点。

二、实验原理  
    植物多倍体是指体细胞中含有3个或3个以上染色体组的个体。自然界中有许多植物是多倍体,是变异发生的重要途径之一。多倍体的研究在育种工作中非常重要,因为利用多倍体可以改良作物的某些经济性状,同时还可利用多倍体克服远缘杂交过程中的障碍。
     利用一些诱发因素可以人工诱导植物产生多倍体。这些因素包括物理的因素,如温度的聚变、射线处理等,还有化学因素,如植物碱、植物生长激素等。在众多方法中,最有效的方法是利用从百合科植物秋水仙(Colchicum autumale)中提取的秋水仙碱进行处理。秋水仙碱的分子式为C22H25NO6,常用的有效浓度为0.01~0.4%。
    秋水仙碱是细胞有丝分裂的抑制剂,它的主要作用是抑制纺锤丝微管的形成,因而抑制了染色体移向两极的运动,使细胞停滞在中期状态而不能分裂成二个新的子细胞,而秋水仙碱对染色体结构并无明显的影响,对细胞也不产生严重毒害,细胞解除秋水仙碱环境后仍可正常生长分裂,因而出现细胞含有多个染色体组的情况,亦即构成了多倍体细胞。如果用秋水仙素处理植物的根尖,则在根尖分生区内可检测到大量染色体加倍的细胞,若处理植物幼苗的芽,则可以得到染色体加倍的植株
     鉴定多倍体植株的方法有两种:形态学鉴定是观测叶片气孔保卫细胞、花、果实、种子的形态、花粉粒大小及育性等性状的变异,这是一种间接的鉴定方法;细胞学鉴定是观测根尖、茎尖分生组织或花粉母细胞的染色体数目,这是一种直接的鉴定方法。
三、实验材料
洋葱(Allium cepa,2n=16)、蚕豆(Vicia faba,2n=12)、西瓜(Citrullus vulgaris ,2n=22)等作物的种子、根尖、花蕾或幼苗。
 四、用具及药品
    显微镜、烧杯、培养皿、载玻片、盖玻片、剪刀、镊子、刀片、解剖针、纱布、吸水纸等。秋水仙碱、改良品红染色液、无水酒精、冰醋酸、1N盐酸。
 五、实验步骤
    1. 多倍体的诱发:可处理萌动种子,幼苗或植株生长点,浓度以0.01~0.4%为宜;在以实验室观察为目的的情况下,可以处理根尖。
    2.植株形态特征的观察:或整个植株、或组织、器官、细胞都可以看到增大,其中气孔,保卫细胞表现尤为明显。
3.细胞学观察:用根尖压片法制成染色体玻片标本,在显微镜下认真观察和染色体计数(图13-1,13-2),与对照进行对比。
 
   图13-1 洋葱根尖细胞染色体(染色体加倍)  图13-2 洋葱根尖细胞染色体(正常二倍体细胞)
 六、作业与思考
    1.与对照植物相比,处理后的多倍体植物有哪些不同特征?
    2.你观察到的被鉴定物种的染色体数目是多少?
3.使用秋水仙诱导多倍体时应注意哪些问题?

 

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