实验三 琼脂糖凝胶电泳检测DNA

一﹑[目的要求] 
通过本实验学习琼脂糖凝胶电泳检测DNA的方法和技术
二﹑[实验原理] 
DNA分子在琼脂糖凝胶中时有电荷效应和分子筛效应。DNA分子在高于等电点的溶液中带负电荷，在电场中向正极移动。在一定的电场强度下, DNA分子的迁移速度取决于分子筛效应.具有不同的相对分子质量的DNA片段泳动速度不一样,可进行分离.凝胶电泳不仅可分离不同分子质量的DNA, 也可以分离相对分子质量相同,但构型不同的DNA分子。
三﹑[教学内容] 
1.电泳基本知识介绍
2.琼脂糖凝胶的制备
3.电泳检测质粒DNA及其部分酶切和不完全酶切的产物
4.质粒及其酶切产物的定量
四﹑[实验材料和用品]
恒温培养箱、台式离心机、高压灭菌锅、水平电泳系统、紫外透射仪、TAE电泳缓冲液、EB、加样缓冲液、琼脂糖等
五.[实验步骤]
见教材
六.[结果与分析]
在紫外灯(360nm或254nm)下观察染色后的电泳凝胶,并估计DNA样品量.
七.[问题与讨论]
影响凝胶电泳结果的因素有哪些?