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实验六 植物基因组DNA提取及检测
一﹑[目的要求]
1.学习植物DNA分离的原理
2.掌握植物基因组DNA提取的方法
3.了解植物基因组DNA提取与动物基因组DNA提取方法的不同
二﹑[实验原理]
利用液氮对植物组织进行研磨,从而破碎细胞.细胞提取液中含有的SDS溶解膜蛋白而破坏细胞膜,使蛋白质变性而沉淀下来.EDTA抑制DNA酶的活性.再用酚﹑氯仿抽提的方法去去除蛋白,得到的DNA溶液经乙醇沉淀.
三、[教学内容]
1.材料的选择
2.介绍细胞破碎的不同方法
3.DNA的提取
4.DNA纯度的鉴定
四﹑[实验材料和用品]
低温离心机,恒温水浴锅,台式离心机,琼脂糖凝胶电泳系统;Tris,EDTA,NaCl,β巯基乙醇,等;细胞提取液(100mmol/L Tris.HCL pH8.0 ,5mmol/L EDTA pH8.0 ,500mmol/L NaCl ,1.25% SDS ,1mol/L β巯基乙醇);5mol/L KCl ;TE.
五.[实验步骤]
见教材
六.[结果与分析]
提取到的DNA应为一条带,若DNA降解会出现弥散带型.
七.[问题与讨论]
本实验DNA带型与质粒DNA带型有什么不同,为什么?
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