实验目的：
1、通过植物细胞叶绿体的分离，了解细胞器分离的一般原理和方法。
2、观察叶绿体的自发荧光和次生荧光，并熟悉荧光显微镜的使用方法。
实验原理: 将组织匀浆后悬浮在等渗溶液中进行差速离心是分离细胞器的常用方法。一个颗粒在离心场中的沉降速率取决于颗粒的大小，形状和密度，也同离心力以及悬浮介质的黏度有关。在一个给定的离心场中，同一时间内，密度和大小不同的颗粒其沉降速度不同。依次增加离心力和离心时间就能够使非均一悬浮液中的颗粒按其大小，密度先后分批沉降在离心管的底部，分批收集即可获得各种亚细胞组分。
叶绿体的分离应在等渗溶液中进行，以免渗透压的改变使叶绿体受到损伤。将匀浆液在1000r/min的条件下离心2min，以除去其中的组织残渣和一些未破碎的细胞，然后在3000r/min的条件下离心5min，即可获得沉淀的叶绿体（不纯）。分离过程最好在0～5℃的条件下进行。
得到的叶绿体制成涂片在荧光显微镜下观察，叶绿素有火红色荧光，但不清楚（叶绿素在完整叶绿体中荧光不强）。叶绿体可吸附丫啶橙后发出明显的橘红色荧光。
实验用品:
1 器材: 荧光显微镜, 普通离心机 组织捣碎机 剪刀 镊子 刀片 表面皿 载玻片 盖玻片 吸水纸
2 试剂：0.35mol/L氯化钠溶液， 0.1％丫啶橙
3 材料：新鲜菠菜， 学生自采材料（作探索性试分离，并与菠菜叶绿体的分离做比较）。
实验过程：取材——洗净——捣碎制成匀浆——过滤——离心1——离心2——制片观察
