一、实验目的:
1、了解细胞膜的渗透性及各种物质进入细胞的速度。
2、了解血影分离的基本原理及方法,并观察血影与红细胞的区别,了解血影在不同环境条件下的形态变化。
3、了解膜蛋白分离的基本方法,以便将细胞生物学知识与生物化学知识及方法联系起来。
二、原理
细胞膜是细胞与外界环境进行物质交换的结构。可选择性地让某些物质进出细胞,各种物质出入细胞的方式是不同的,水是生物界最普遍的溶剂,水分子可以按照物质浓度梯度从渗透压低的一侧通过细胞膜向渗透压高的一侧扩散,以至于在高渗环境中,动物细胞会失水而收缩;在低渗环境中,动物细胞会吸水膨胀直至破裂。
本实验将红细胞分别放于各种等渗溶液中,由于红细胞膜对不同溶质的通透性不同,使得不同溶质透入细胞的速度相差很大,有些溶质甚至不能透入细胞。当溶质分子进入细胞后可引起渗透压升高,水分子随即进入细胞,使细胞膨胀,当膨胀到一定程度时,红细胞膜会发生破裂,血红素溢出,此时,原来不透明的红细胞悬液突然变成红色透明的血红蛋白溶液,这种现象称为红细胞溶血。
由于各种溶质进入细胞的速度不同,所以不同的溶质诱导红细胞溶血的时间不同,相反可通过测量溶血时间来估计细胞膜对各种物质通透性的大小。
三、方法
1.观察 10%的兔红细胞悬液,可见该悬液为一种不透明的红色液体
2.观察溶血现象 取一支试管,加入0.4ml兔红细胞悬液,再加入4ml蒸馏水,混匀后注意观察溶液颜色的变化,可见溶液由不透明的红色变成透明的红色液体(可将试管贴靠在书上,隔着试管看书中的字,如发现溶血则文字可被看清)。
3.观察兔红细胞对不同物质的通透性
(1)取一支试管,加入0.4ml兔红细胞悬液和0.17M的Nacl溶液4ml,轻轻摇匀,用上述方法观察是否出现溶血现象,如出现溶血,记下发生溶血所需要的时间(从加入4ml溶液算起)
(2)按上述方法分别加入下列6中溶液是否导致红细胞溶血并记录实验结果。
①0.32M 葡萄糖 ④0.17M 硝酸银
②0.32M 甘 油 ⑤0.32M硫酸钠
③0.32M 乙 醇 ⑥0.17M 草酸胺
四.作业
将下表画在作业本上,填写结果。
试管编号 所加试剂和浓度 是否溶血 时 间 结果分析
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4
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