实验目的:
了解细胞损伤的过程及死活细胞的鉴别方法。
实验原理:
类坏死是细胞介于生活与死亡之间的临界状态。引起类坏死的方法多种多样,如高温、冷冻、紫外线照射、酸碱处理等。深度引起类坏死的处理会引起死亡。类坏死与死亡间最主要的区别在于前者发生的变化是可逆的,而后者是不可逆的。
细胞发生类坏死及死亡其生理和结构均发生一系列变化,这些变化可用活体染色法显现出来。活体染色有活体内染色和活组织染色两种。活体染色常用的染料有中性红、台盼兰、藻红B、苯胺黑等。
本实验以氨水和醋酸处理蝌蚪皮肤及培养的细胞,说明类坏死及其恢复和死活细胞的鉴别方法。
实验用品:
1.材料:蟾蜍或青蛙的后肢芽期蝌蚪;培养的细胞悬浮液。
2.器材:培养皿,解剖器,血细胞记数板,解剖镜,显微镜,培养箱。
3.试剂:Ringer液;Hank液;氨水;醋酸水;台盼兰;中性红。
实验内容:
1.蝌蚪皮肤的类坏死处理及活体染色。
2.培养细胞的类坏死处理及活体染色。
作业:总结实验结果。